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水中总大肠菌群、粪大肠菌群的快速测定

2005-12-27 12:46:25
水中总大肠菌群、粪大肠菌群的快速测定

  本方法适用于医院污水、生活污水、垃圾渗滤液,以及其他行业(如餐饮业、食品加工等)排入地表水中的污水,快速测定总大肠菌群或粪大肠菌群。
  1.方法原理
  应用灭菌的滤纸吸收选择性培养基,细菌通过滤纸纤维膨胀而被固定并生长繁殖,大肠菌群在发育时伴随产生琥珀酸脱氢酶将纸片上的TTC(红四碳唑)还原成不可逆的甲臜(Formazane)产生红色色素,即大肠菌在纸片培养基上呈红色菌落,菌落周围产生黄圈是大肠菌分解乳糖产酸使指示剂变色的结果。
  2.水样采集
  用采水器或其他灭菌器采集水样500ml放入灭菌瓶内,如果是经加氯处理的废水,需加1.5%硫代硫酸钠5ml除去余氯。
  3.方法和步骤
  每份预监测水样,接种水样总量为55.5ml,分别接种大纸片五张,小纸片10张。每张大纸片接种10ml水样,五张小纸片每张接种1ml,另五张小纸片接种1:10稀释的水样lml。接种水样时要均匀涂布于纸片上,用手轻轻压平,作好标记于铺有湿纱布的搪瓷盘中。测总大肠菌群37℃±l℃培养18~24h观察结果,测粪大肠菌群44.5℃±l℃培养18~24h,观察结果。
  4.判定标准
  ①纸片上出现紫红色菌落,周围有黄圈者为阳性或出现片状红晕周围为黄地者亦为强阳性。
  ②纸片为一种颜色而无菌落生长者为阴性。
  ③纸片呈紫红色或紫色,菌落周围无黄圈者为阴性。
  ④酸性水样接种后纸片变黄,经培养无紫红色菌落者为阴性。
  ⑤纸片变色并呈不典型菌落结果可疑者,应作复发酵进行验证。
  5.报告结果
  根据阳性纸片张数,查MPN值表(如水样污染较重可采取适当稀释后接种,查表5-2-10 MPN表后乘以稀释倍数,报出结果),报出1L水中大肠菌群或粪大肠菌群数。

 

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